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, M; p9 m: n' c6 ` 原创 陈颖婷王洁陶瑞旸 上海法治报
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2 a2 p5 D' z; E4 c+ q 图源网络
* T( }3 E' G" F6 C; s6 Z* D 野生动物面临灭绝的危险 6 o( |: ^+ z2 @1 z; k
鲸鱼的低语、鹈鹕的呐喊、失去犀牛角的犀牛妈妈奄奄一息的模样、面对盗猎者不知所措的小海豹……这些在野生动物保护的公益视频宣传片《Dream》中的画面是否让你柔软的内心受到触动？
( z4 `6 e3 ?6 P 在全球范围内，随着2018年世界上最后一头雄性北方白犀牛的去世，如今这个星球上仅剩下最后两头雌性北方白犀牛，非洲北方白犀牛的灭绝已是板上钉钉，印度犀、爪哇犀、苏门答腊犀、黑犀也都处境惨淡。栖息地的丧失、犀牛角的非法活动等等都是其灭绝的原因。事实上，犀牛面临的情况，或多或少也是所有濒危野生动物共同面临的问题。2020年，世界自然基金会发布的《地球生命力报告》显示，从1970年到2016年野生动物种群数量消亡了68%，最近数十年，地球物种消失的速度是数百年前的100到1000倍。这些灭绝发生在日益支离破碎的亚马孙雨林中，在迅速变暖的安第斯山，在大堡礁的外围海域里，甚至就在你家的后院里。在把其他物种推向灭绝的过程中，人类也在忙着锯断自己栖息的那根树枝。 0 i$ K1 G+ U w) U# Y+ E; A
此时，科技工作者如何能够协助打击犯罪，保护濒危动物呢？ 5 F# U) c% ]+ `' F: Z0 I* P+ F
DNA条形码技术鉴定动物种属 ) Z1 t# V" |4 g
在惩戒犯罪的过程中需要完整的证据链，只有明确野生动物的种属才能进一步确定其保护级别，从而对犯罪分子进行定罪、量刑，这也就涉及濒危野生动物的物种鉴定问题。
3 Y- M T# g! Q% X6 r I 根据《野生动物及其产品的物种鉴定规范》，物种鉴定指标通常包括宏观形态学、微观形态学、生物化学和分子生物学指标。以往常常是通过形态学进行鉴定，也就是通过动物的外形特征进行物种的分类。然而，形态学鉴定的劣势也很明显，其对动物种属的分辨能力并不是很高，且基于肉眼观察的形态学方法不免受到一定的主观影响。因此，我们倾向于联合采用更加精确的、客观性更强的分子生物学技术进行物种鉴定。目前最常用的分子生物学鉴定技术为DNA条形码技术，基于这项技术对动物DNA的检验，可以直接、精确地判断其种属，也可以作为形态学鉴定困难时的补充。 1 S( { x, l& _; K M
DNA与DNA条形码 7 q) Q* Z0 e+ [ p' u7 p0 i- S& Q
DNA是生物的主要遗传物质之一，DNA分别由A/T/C/G四种脱氧核糖核苷酸组成。不管是不同物种（人、猴子、猫等等）之间，还是每个物种的不同个体之间，DNA序列都是不一样的。一段长度为10碱基对的DNA序列，如果严格规定读取顺序，那么理论上，这段序列就有4^10即1048576种组合方式，而我们每个人都有31.6亿DNA碱基对，由此可见DNA包含的信息量是极其庞大的。
9 T: |- F1 K% [- k+ n0 E) J" @ DNA条形码与我们日常所见的商品条形码非常相似。商品条形码是由宽度不等的多个黑条与空白按照一定编码规则排列、可以表达一组信息的图形标识，只需轻轻扫描，商品的名称、编号、价格便跃然于电脑屏幕上。 . T9 B1 c( a- V' D: f
DNA条形码是某一物种特有的DNA序列片段，我们可以通过分子生物学手段将这条DNA序列“扫描”出来，一旦读取出这种特异性的“条形码”，我们就可以判定，这段DNA条形码所对应的物种。当然，不是所有的DNA序列片段都能够作为DNA条形码来使用，理想的DNA条形码应具有以下条件： % ^5 {; R, q% f& X5 O
1、物种特异性，即一段DNA序列仅存在于一个物种，对于不同的物种可以用其两侧相同的DNA区域进行标准化操作。只有这样我们才能对不同种属的动物进行精准的识别。 . Y2 r* u) F, I. F. N
2、序列片段能够在种内稳定遗传，即该序列在种内的不同个体之间变异小，这也就代表着这段DNA序列片段应具有遗传稳定性。
& F' k* T( G( X' s" y) @! { 3、目标DNA片段应包括足够多的系统进化信息，便于不同分类等级生物的物种鉴别。 " G; R d* O4 x
4、DNA序列的长度相对较短，使用较短片段的DNA作为条形码的优势在于，相较于长片段DNA，它抗降解能力更强，更容易被检测出来，即灵敏度更高。
) c2 W( v' K2 m; [$ z 5、引物通用性强、扩增成功率高，用作DNA条形码的DNA片段需具有高度保守的引物结合区，这样就可以用通用引物对各个物种进行扩增与检测。
J9 X9 n5 X( S, _ DNA条形码技术的实际应用 3 }0 f" ?1 u. ]- i8 x: M3 a
2020年，上海海警查获了数吨疑似鲨鱼翅的生物组织，这些组织究竟是不是鲨鱼翅？来自哪种鲨鱼？是不是濒危保护动物？这些都需要司法鉴定人给出答案。在这个案件里，我们就应用了线粒体细胞色素c氧化酶亚基I（COI）基因上的DNA条形码来回答这些问题。 . ?4 d/ l7 o5 j0 o# E0 e: N# X
该案例中，我们抽查了其中137份疑似鲨鱼翅的生物组织，由于组织存放时间过长，其中2份无法提取DNA，其余135份生物组织可比中18种鲨鱼，而其中97份（72%）都为收录于《濒危野生动植物种国际贸易公约》 （CITES）附录II中的濒危物种。鲨鱼种类繁多，相似物种之间外观形态差异小，仅凭传统形态学鉴定，难以保证干鱼翅制品鉴定的准确性。而我们应用的DNA条形码技术能够准确地对其进行物种鉴定，对不法分子定罪、量刑形成较强的威慑，从而规范鱼翅市场乱象，进一步保护濒危鲨鱼。除了COI基因，核糖体16S和12S基因上的DNA条形码等均可应用于动物种属鉴定。 2 P# S+ l* q" L% h) z. _
无论用什么方法鉴定野生动物的种属，我们的最终目的是打击犯罪、保护野生动物。2021年2月，国家林草局和农业农村部公布了新版《国家重点保护野生动物名录》，更多的动物升级为国家一级保护野生动物；同年3月，《中华人民共和国刑法》确定罪名的补充规定（七）中规定，非法猎捕、杀害珍贵、濒危野生动物和非法收购、运输、出售珍贵、濒危野生动物、珍贵、濒危野生动物制品，都将被定为危害珍贵、濒危野生动物罪。
( {5 x. M, D e 法网恢恢，疏而不漏 ! w* z( e6 D' S) N$ g& c
法制的健全与科技的进步 1 o' o5 S* e" A; L0 a4 s8 [
必将让危害野生动物的犯罪行为
2 O! a# K7 j' E* w5 p4 j 无处遁形
( [9 }1 j! t* n$ M* K 作者 | 陈颖婷 王洁 陶瑞旸
8 k5 Z! x& S% L 编辑 | 谢钱钱 1 p7 T6 P% I" G( b- B6 b2 O/ [
原标题：《数吨疑似鲨鱼翅走私上海！是不是濒危保护物种？司法鉴定揭真相…》
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