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( g2 L! p3 f$ {. ~# ? 原标题：彗星法DNA损伤分析试剂盒，快速灵敏测试 / K2 U" ^. N0 C. I
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彗星检测试剂盒（3孔载玻片）是一种单细胞凝胶电泳检测（SCGE），用于检测细胞中DNA损伤的快速灵敏测试。其原理是，在器官或组织遭受（如辐射、重金属等）后，细胞中的单链或双链DNA断裂，将细胞与融化的琼脂混合并放在玻片上，然后用裂解溶液破坏细胞膜，用碱性溶液解开DNA。最后，对样品进行电泳，在电场的作用下，正常细胞的大分子DNA迁移较短的距离，完整的DNA保留在细胞核的范围内，DNA碎片从细胞核中迁移出来，用PI染料染色，在荧光显微镜下观察，完整的脱氧核糖核酸形成圆形或微辫状；DNA碎片形成彗星状图案。根据电泳缓冲液的pH值，可分为中性彗星试验（pH=8.4）和碱性彗星试验（pH>13）。中性彗星法主要用于检测DNA双链断裂损伤，碱性彗星法具有较高的灵敏度，可用于检测较少的单链和双链断裂损害。
, Q6 X! B( p+ Q" p& e- d2 u( K# X 艾美捷彗星法DNA损伤分析试剂盒： 8 M4 J8 B; k2 B# A/ t! ^. z, M
目录号：D-AKE3040 # ?$ ?5 j% ^: @1 c( W2 Q& B5 K
尺寸：15T
" T- W% w6 X( }0 `, ` 储存：在4°C下储存6个月，避光
! Y/ r; N X* u- [7 { 彗星法DNA损伤分析试剂盒（3孔载玻片）: : T8 ]+ r/ B$ Y& w1 I$ }
套件组件尺寸（15T）储存条件 8 ]0 @/ J" a7 o- b* [
彗星载玻片（3孔）5 4℃ ; Z* N& ^ ~, o. X9 n' h7 n
10×赖氨酸溶液15 mL 4℃ " _. n: E4 D6 U
EDTA（500 mM）25 mL 4℃
4 N' t8 I0 o9 z- T 琼脂（低熔点）15 mL 4℃
" z6 V4 G- _8 e( K) w% Z 碘化丙啶（PI）（50x）20μL 4℃，避光 8 |, V1 M$ E0 O5 u
40 mM Tris-HCl（pH 7.5）15 mL 4℃
: N0 d* x, O8 |. f7 ?3 i9 r 彗星法DNA损伤分析试剂盒试剂准备：
) o, C8 d; O9 ` 彗星幻灯片（3孔）：随附随用。使用前将其平衡至室温。在4℃下储存。10×赖氨酸溶液：供应即用。使用前将其平衡至室温。在4℃下储存。EDTA（500mM）：供应时即用。使用前将其平衡至室温。储存温度为4℃。
7 T( @2 I# b1 V2 u0 ] 琼脂（低熔点）：将琼脂（低沸点）瓶在90-95°C的水浴中加热20min，直到琼脂液化。将瓶子转移到37°C水浴中20分钟以保持液态。将其余部分等分并在4℃下储存。
5 O( I) ]5 }' A 碘化丙啶（PI）（50×）：使用前新鲜制备，用PBS稀释50倍至1×PI染料浓度，在4°C下储存并避光。
) u) U3 ]- { I( B3 ] 40 mM Tris-HCl（pH 7.5）：在使用前制备，用PBS稀释100倍至0.4 mM Tris-HCl（pH7.5）的浓度，并在4°C下储存。 5 e- i7 g" y# }- e; K* h
1×裂解缓冲液：制备100 mL 1×裂解液 0 b2 V! L$ d: V
可以使用以下方法之一测量尾力矩： ' \6 s- d0 t, i1 g* w( Z9 o
（a） 橄榄尾力矩=尾DNA%×尾力矩长度（从头部中心到尾部中心测量，见图1）
+ X, ? n$ W6 e0 D6 R) J4 P （b） Extent Tail Moment=Tail DNA%×Tail Length（见图1）彗星测定结果分析软件可通过Opencomet、CASPlab和彗星测定IV（PerceptiveInstruments）等获得。 9 ?1 W' W$ ]5 w* X- w1 U
6 o+ |* N; G/ B& v 图1：彗星试验中的DNA损伤。
1 @: Y% H0 h D% B, A 图2：定性方法：DNA损伤按尾DNA%的比例分为五级
8 c) Y, H) _# t! W, f" e% e 该试剂仅用于科学研究领域，不适用于临床诊断或其他用途。返回搜狐，查看更多 4 Y* { U) ^5 l+ {# ^# g* S7 E
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责任编辑： / @3 C ]8 q2 l9 D M8 B
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